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              液氮罐冷凍-喚醒新生物

              時(shí)間:2017-11-24 09:21來(lái)源: 作者:班德液氮罐 點(diǎn)擊:

                一株在中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心沉睡了20年之久的古老菌種,最近因?yàn)轫n春雨事件火了起來(lái)。這個(gè)叫做格氏嗜鹽堿桿菌的菌種,在河北科技大學(xué)副教授韓春雨的利用下,實(shí)現(xiàn)了基因組編輯技術(shù)NgAgo-gDNA而出名。

                日前發(fā)布的《中國(guó)微生物資源發(fā)展報(bào)告2016》顯示,世界各保藏中心共保有96907個(gè)用于專利程序的生物材料,其中中國(guó)普通微生物菌種保藏中心保藏的專利菌株為11977個(gè),位列全球第2。

                9月14日,記者走進(jìn)中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心(簡(jiǎn)稱保藏中心),探尋微生物菌種的日常生活。

                支撐未來(lái)的“生命”銀行

                中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心高級(jí)工程師辛玉華說(shuō),格氏嗜鹽堿桿菌是20年前由中科院微生物所老所長(zhǎng)周培瑾研究員從蘇格蘭交換來(lái)到中國(guó),其最先分離于肯尼亞馬加迪湖。作為保藏中心五千多種微生物中的一員,格氏嗜鹽堿桿菌或通過(guò)真空冷凍干燥法,或借助-190℃左右的液氮超低溫凍結(jié)法處于休眠狀態(tài)。

                一些菌種甚至在冷藏室中沉睡了半個(gè)多世紀(jì),“一旦有需求,它們就會(huì)被喚醒并投入應(yīng)用。”辛玉華說(shuō)。但如今,地球上99%的微生物人類還是不知道如何培養(yǎng)。只有經(jīng)過(guò)培養(yǎng),才知道它們未來(lái)能夠做什么,并最終實(shí)現(xiàn)利用。

                “我們選擇的菌種,一般要有潛在應(yīng)用價(jià)值和豐富的生物多樣性。現(xiàn)在,越來(lái)越多的微生物被‘喚醒’,并在各個(gè)領(lǐng)域一顯身手。”辛玉華說(shuō)。菌保中心保藏的微生物是經(jīng)過(guò)幾代人長(zhǎng)期且持續(xù)累積來(lái)的,只有時(shí)間才能體現(xiàn)微生物資源保藏的價(jià)值。另外,微生物資源事關(guān)生物技術(shù)創(chuàng)新的未來(lái)。

                值得注意的是,今年5月,美國(guó)宣布啟動(dòng)“國(guó)家微生物組計(jì)劃”,美國(guó)政府將在未來(lái)兩年投入1.21億美元作為啟動(dòng)資金,數(shù)十所大學(xué)和研究機(jī)構(gòu)未來(lái)幾年將投入4億美元。

                菌種保藏有雙重“保險(xiǎn)”

                作為我國(guó)可同時(shí)提供一般菌種資源服務(wù)和專利生物材料保存的國(guó)家級(jí)保藏中心,保藏中心于1995年被列入“布達(dá)佩斯條約國(guó)際保藏單位”,成為一個(gè)持有國(guó)際牌照的微生物“銀行”。

                “這里主要是收集、保藏、鑒定、交換和供應(yīng)各類生物材料。”辛玉華告訴科技日?qǐng)?bào)記者,一些研發(fā)中分離出的菌種,暫時(shí)不知道有什么功能,就作為資源儲(chǔ)備儲(chǔ)存;而研究課題需要收集、篩選的菌類,結(jié)題后也可存放備份。幾十年來(lái),保藏中心共提供了幾十萬(wàn)株各類微生物菌種,在我國(guó)生命科學(xué)和生物技術(shù)研發(fā)中貢獻(xiàn)卓著。

                走進(jìn)位于地下的保藏中心,空氣中彌漫著絲絲涼氣,和室外的悶熱對(duì)比鮮明。在這間百十來(lái)平米的液氮生物儲(chǔ)罐室中,放滿了30來(lái)個(gè)容量為750升的“大罐子”,5.3萬(wàn)個(gè)如細(xì)菌、真菌、酵母等的微生物菌種暗藏其中。

                “幾乎所有的菌種都貯存于液氮中,生物材料都先在這里保藏并‘備份’。”辛玉華提起一個(gè)液氮罐蓋子,蒸騰著的氮?dú)鈸涿娑鴣?lái),記者下意識(shí)的往后退了下。透過(guò)繚繞的霧氣,各式各樣的微生物菌種在小鐵盒子里“睡大覺(jué)”。

                “液氮罐里的溫度維持在-190℃左右,菌種在這里可以保存幾十年。”辛玉華指著天花板說(shuō),當(dāng)液氮變少時(shí),樓上的“巨無(wú)霸”液氮罐會(huì)自動(dòng)感應(yīng)并及時(shí)添加,這些造價(jià)昂貴的“制冷劑”從天津直運(yùn)而來(lái)。

                來(lái)到低溫冷藏室,好像進(jìn)了銀行的保險(xiǎn)庫(kù)。一排排直抵天花板的不銹鋼鐵柜,每個(gè)柜子整齊排列著很多像“抽屜”般的隔間。拉出一個(gè)“抽屜”,就能看到很多支真空小玻璃管里存放著不同編號(hào)的菌種。試管中裝有淡黃色、已經(jīng)干燥處理的保護(hù)劑,藏在其中的是“休眠”中的微生物,這種保藏方法就被稱為真空冷凍干燥法。

                經(jīng)過(guò)雙重“保險(xiǎn)”保藏的菌種,一株菌售價(jià)只有500—1000元。作為公益性機(jī)構(gòu),保藏中心的價(jià)格不貴且質(zhì)量有保證。值得注意的是,新的微生物物種需要經(jīng)過(guò)保藏中心核實(shí)、保藏后才能在國(guó)際期刊生效發(fā)表,而這正是中國(guó)普通微生物菌種保藏中心具有的權(quán)威性。

                一個(gè)菌種的“生死”循環(huán)

                目前,保藏中心保存有各類微生物資源5700種、50000余株,用于專利程序的生物材料有1萬(wàn)余株。那么,數(shù)目龐大的微生物資源,從“清醒”到被“沉睡”經(jīng)歷了什么?

                “菌種被送來(lái)后,首先進(jìn)行存活度和純度檢測(cè),然后用基因測(cè)定來(lái)核實(shí)菌種的正確性,繼而用真空冷凍干燥法或液氮超低溫凍結(jié)法保存菌種。”辛玉華說(shuō),保藏菌種時(shí)一般兩種方法會(huì)互為備份,使用液氮法保存6份,真空法則要備份12個(gè)。

                “通過(guò)冷凍技術(shù)處理后,細(xì)菌就會(huì)處于休眠狀態(tài)。如果要活化使用,則需通過(guò)相應(yīng)的培養(yǎng)液進(jìn)行活化,才能恢復(fù)活性。”辛玉華以格氏嗜鹽堿桿菌為例說(shuō),復(fù)活菌種所需的營(yíng)養(yǎng)為:20%的氯化鈉,酪蛋白、氨基酸、pH值為9等,在適宜的溫度和培養(yǎng)基中,這些沉睡的細(xì)菌便會(huì)被重新喚醒。

                專利靠前但“短板”尚存

                如今,這里還保存著中科院微生物所送給毛主席的第一支靈芝菌種,有利于女性減肥的鼠李糖乳桿菌,還有可以減少田間施肥的同氮菌……

                科學(xué)家相信,當(dāng)今時(shí)代人類面臨的挑戰(zhàn),包括養(yǎng)活眾多的人口、生產(chǎn)可持續(xù)的能源、保護(hù)環(huán)境或減緩對(duì)環(huán)境的破壞,以及人類健康等等,都與生物學(xué)相關(guān),可以從微生物世界中找到解決方案。

                于是,越來(lái)越多的菌種被發(fā)現(xiàn)并喚醒后應(yīng)用于人們生活。和其他知識(shí)產(chǎn)權(quán)專利不同,微生物是唯一一種可通過(guò)專利保護(hù)的生命形式,過(guò)去幾年間,我國(guó)專利微生物年保藏量增長(zhǎng)速度一直位居世界第一。

                在保藏中心工作了20年的辛玉華坦言,自2000年以來(lái)硬件設(shè)施得到極大改善,如今這里擁有了全世界一流的實(shí)驗(yàn)設(shè)備。但記者在實(shí)驗(yàn)室看到,像氨基酸分析儀、λ35紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)及PTP1溫控系統(tǒng)、Qpix2全自動(dòng)菌落挑取系統(tǒng)、變性高效液相色譜儀等必備高端設(shè)備,均產(chǎn)自德國(guó)、美國(guó)、日本;而國(guó)產(chǎn)的僅有普通冰箱、電磁爐、色譜儀等低端設(shè)備。

                “硬件設(shè)施和保藏技術(shù)都是國(guó)際先進(jìn),和國(guó)外的差距是菌種種類的多樣性還不夠豐富。”辛玉華介紹,美國(guó)典型菌種保藏中心為純商業(yè)機(jī)構(gòu),菌種保藏的較全面、應(yīng)用型也更強(qiáng);德國(guó)微生物菌種保藏中心是歐洲規(guī)模最大的生物資源中心,細(xì)菌菌種保存見(jiàn)長(zhǎng);而半政府性質(zhì)的荷蘭微生物菌種保藏中心,真菌菌種最為齊全。

                “保藏中心一方面通過(guò)各種途徑廣泛收集新物種及新用途菌株,另一方面也與國(guó)外一流的菌保中心互相交換菌種,進(jìn)而補(bǔ)充豐富菌種種類。”辛玉華說(shuō),此前世界微生物數(shù)據(jù)中心發(fā)表了全球微生物資源數(shù)據(jù)共享北京宣言,倡導(dǎo)重大微生物信息化國(guó)際合作計(jì)劃,推動(dòng)全球微生物資源信息化建設(shè)邁向新高度。

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