牛精液冷凍保存是將精液進行特殊處理,保存在超低溫下,以達到長期保存的目的。通常采用液氮(-196℃)和干冰(-79℃)保存。其優(yōu)點是可長期保存,使用不受時間、地域以及種用雄性動物壽命的限制??沙浞痔岣吖5睦寐省,F(xiàn)將冷凍精液的保存和怎樣進行解凍及給母牛輸精的有關(guān)技術(shù)操作介紹如下,供參考。
液氮罐
稀釋液的配方
12%的蔗糖液75毫升、甘油5毫升、卵黃液20毫升。
稀釋方法
將經(jīng)過檢查合格的精液按1∶2倍~5倍稀釋液進行稀釋,其稀釋原則應(yīng)保證每個顆粒精液中所含精子數(shù)不少于3000萬個~4000萬個,解凍后呈直線前進運行的精子不少于1500萬個。
冷凍
在裝有液氮的容器上置一銅紗網(wǎng),距液氮面2厘米左右。將平衡后的精液用滴管按一定量滴于銅紗網(wǎng),滴完最后一滴停3分鐘~5分鐘,當精液顆粒顏色變白時,立即浸入液氮,并將全部顆粒取下,收集于儲精瓶或紗網(wǎng)布袋內(nèi),并做好標記,然后立即移入液氮罐中儲存。
解凍
將預(yù)先配制好的9%檸檬酸的溶液1毫升,放入干凈的小試管中,再置于40℃左右的溫水杯中,迅速取顆粒冷凍精液1粒放入試管。輕輕搖動至化凍時,從水杯中取出試管,接著檢查精液活力,即為合格品。
重視保精、快速解凍與鏡檢
1、根據(jù)液氮罐的性能要求,定期添加液氮,罐內(nèi)盛裝凍精的提筒不能露在液氮外面。
2、取精時,盡可能用長鑷子,切勿將提筒或紗布袋提到臨界線以上處(罐頂10厘米左右)。
3、從液氮中取出細管凍精時,要輕輕甩一兩下,將塑料細管的棉塞端放入35℃~40℃的溫水中,把封口端留在水外3厘米外,待管內(nèi)精液融化一半時,立即取出備用。
4、解凍后的精液鏡檢時,精子的活力不低于標準方可用于輸精,才能確保正常受精。
液氮罐
5、解凍后的精液應(yīng)立即輸配,不宜停放時間過長,應(yīng)做到現(xiàn)解凍,現(xiàn)輸精。
適時輸精
母牛正常排卵是在發(fā)情結(jié)束后6小時~12小時,精子在母牛生殖道的存活時間為12小時~20小時,且還需要4小時~6小時的獲能過程,才能與卵子結(jié)合受精。精子15分鐘就會到達輸卵管受精部位,因此,讓精子早于卵子到達輸卵管受精部位是提高受胎率的先決條件。
1、適宜的輸精時間:在母牛的發(fā)情后期。此時母牛表現(xiàn)精神平穩(wěn),外陰部腫脹消失,陰道不再流出透明液體。直腸檢查卵泡脹大,表面緊張,有一觸即破之感,此時輸精時間。
2、適宜的輸精部位:在子宮頸內(nèi)口1厘米處即子宮體基部,過淺易導致精液外流,過深易損傷子宮內(nèi)黏膜。
3、適宜的輸精方法:直腸把握子宮頸輸精法。將母牛保定,左手插入母牛直腸輕輕握住子宮頸后端,右手將輸精器自陰門向斜上方緩慢插入5厘米~10厘米(以避開尿道口)再改為平插送到子宮頸口,緩慢越過子宮頸管中的皺壁,到達子宮頸基部,慢慢注入精液后,緩緩抽出輸精器。
4、適宜的輸精次數(shù):以1次~2次為宜??稍诎l(fā)情母牛發(fā)情高潮后,黃牛在發(fā)情高潮后6小時~12小時,水牛在發(fā)情高潮后18小時~20小時進行第一次輸精,前后間隔8小時~12小時再進行第二次輸精。
液氮罐