摘要:探討外周血單個(gè)核細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇工藝,實(shí)現(xiàn)外周血單個(gè)核細(xì)胞的長久保存。
自增壓液氮罐
冷凍保存1、2、4、8、12和24個(gè)月后復(fù)蘇細(xì)胞:取出凍存管,迅速投入37℃水浴中,并不斷輕輕搖動(dòng),保證管內(nèi)液體在1min內(nèi)80%溶解,將細(xì)胞吸到6-8mlDMEM洗滌液中,并洗滌凍存管1次,移入50ml離心管中,233×g離心5min。加入6ml培養(yǎng)液,留取500μl數(shù)測細(xì)胞活性。
自增壓液氮罐
體外人工分離的外周血單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)過長時(shí)間冷凍保存后仍可維持其高活性,并可誘導(dǎo)生成具有抗腫瘤活性的細(xì)胞群,該結(jié)果對單個(gè)核細(xì)胞保存、擴(kuò)增活化的自體淋巴細(xì)胞的應(yīng)用具有重要意義。