胚胎干細(xì)胞從囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離得到,具有自我更新和分化為3個胚層和生殖細(xì)胞的潛能。ESC被用于轉(zhuǎn)基因動物和再生醫(yī)學(xué)的種子細(xì)胞。
氣相液氮罐
ESC只在小鼠(Musmusculus)、人(Homosapi-ens)和大鼠(Rattusnorvegicus)等物種中成功建系,在家畜動物中建立ESC系還存在困難。
豬與人的解剖生理相近,是醫(yī)學(xué)臨床應(yīng)用的理想模型動物。從豬囊胚ICM、滋養(yǎng)外胚層和生殖嵴中能夠分離得到多能性干細(xì)胞。這些報道的干細(xì)胞系沒有完全達(dá)到前人研究的ESC的標(biāo)準(zhǔn)。通過外源導(dǎo)入轉(zhuǎn)錄因子將成體細(xì)胞重編程為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞。盡管豬的iPSC已有報道,由于缺少標(biāo)準(zhǔn)的豬多能干細(xì)胞培養(yǎng)體系,豬iPSC的外源基因尚未完全沉默,也缺少代表性的統(tǒng)一特征。探索適合豬多能性干細(xì)胞的培養(yǎng)體系至關(guān)重要。
豬胚胎分離培養(yǎng)體系會改變細(xì)胞核移植胚胎、孤雌胚胎和體內(nèi)胚胎多能基因的表達(dá),也會影響豬多能干細(xì)胞形成的效率和質(zhì)量。豬多能干細(xì)胞存在兩種多能狀態(tài),即始發(fā)態(tài)和激發(fā)態(tài)。始發(fā)態(tài)的豬多能干細(xì)胞與小鼠ES細(xì)胞類似,依賴于LIF/STAT3信號通路。而激發(fā)態(tài)的豬多能干細(xì)胞與人ES細(xì)胞形態(tài)類似,克隆呈扁平狀,依賴于FGF/ERK和TGF-β/ACTIVINA/NODAL信號通路。兩種狀態(tài)之間的基因表達(dá)譜、X染色體狀態(tài)、嵌合能力以及種系傳遞等方面存在顯著差異。由于培養(yǎng)體系的不同,胚胎來源的豬多能干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞之間也存在差異。
氣相液氮罐