發(fā)現(xiàn)新買回來的液氮罐里好多灰,沒辦法用純化水沖洗了幾遍。灰都這么多了,估計什么無菌,內毒素之類的就更沒保障了。
想問一下,
問:大家是直接清洗晾干直接裝液氮就使了嗎,還是有什么滅菌方法嗎?感覺不大好實施。
答:液氮罐應該不用滅菌吧,簡單清潔就可以了。細菌在液氮里和細胞一樣是休眠,不會死。另外我們復蘇的環(huán)境也不是無菌的,所以不用糾結那些在液氮里不繁殖的少量細菌了。
問:因為在檢測細胞庫的各項指標是合格的,所以如果按“一”實施的話來看,液氮條件下細菌是不能生存嗎(細菌直接暴露于液氮)?液氮環(huán)境下其他不利條件也能給消除?
答:如果你實在擔心,國外很多采用氣態(tài)保存,風險較低,因為沒有凍存管與液氮的直接接觸。細胞液氮存放在一般區(qū)域,細胞管從液氮取出后,放入干冰轉移盒中,整體傳遞到C級區(qū)域,在超凈臺或者安全柜旁邊進行水浴復蘇細胞;也有戰(zhàn)友說,直接在細胞液氮存放區(qū)域水浴復蘇,后經(jīng)過傳遞窗直接轉移到C級接種區(qū)域;還有一種干法,不是太好,是直接將細胞管從液氮取出后,不復蘇也不冷凍保護,通過傳遞窗或者物流通道傳遞進去,到C級進行復蘇。傳遞窗可能還快一點,物流通道那豈不是要跑著來干,拿著個未復蘇的細胞也不安全吧。
問:目前好像對液氮的質量沒有什么特殊的要求,是因為液氮是極端環(huán)境,一些方法不好實施嗎?
答:如果你是采用液氮保存,采用凍存管如果不是玻璃拉絲的形式而是塑料管,一定會存在蓋子處封閉不好液氮滲入的情況,此時需要考慮液氮的質量問題,國外就有專門案例,HBV病毒在液氮中鉆入到凍存管中,這就是液氮中一些外源因子起碼是有隱患的,關于液氮罐如何消毒或清潔可以詢問廠家如何進行,但相比下來,液氮質量如何控制,進行哪些指控更為重要。戰(zhàn)友可以展開討論。