腦脊液能夠反映神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理生理變化,對(duì)于神經(jīng)保護(hù)措施以及生物標(biāo)記物的研究非常必要。因此,腦脊液生物樣本庫(kù)與神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)現(xiàn)生物標(biāo)記物及疾病評(píng)估密切相關(guān)。生物樣本庫(kù)保存腦脊液的一個(gè)重要方面是質(zhì)控,這對(duì)于持續(xù)的患者隨訪以及各研究中心之間樣本交換十分必要。通過(guò)系統(tǒng)性地研究以闡明不同前處理和儲(chǔ)存對(duì)于腦脊液中大量蛋白的影響是首要和必要的。
加強(qiáng)國(guó)際網(wǎng)絡(luò)合作以及嚴(yán)格使用標(biāo)準(zhǔn)化操作流程是腦脊液樣本庫(kù)的重要特點(diǎn)。在本文中提到的也是當(dāng)前采用的腦脊液及血液樣本的采集和儲(chǔ)存標(biāo)準(zhǔn)流程使得大規(guī)模在病例及對(duì)照中研究生物標(biāo)記物成為可能??傊?,多個(gè)中心間的合作和努力使得神經(jīng)疾病的生物標(biāo)記物研究已邁入新時(shí)代。生物樣本庫(kù)www.17paimai.com的標(biāo)準(zhǔn)化流程包括樣本收集、質(zhì)量控制以及合理選取生物標(biāo)記物研究中的對(duì)照組,極大地提高了生物標(biāo)記物研究的質(zhì)量。
在各種急性和慢性神經(jīng)系統(tǒng)疾病中,腦脊液能夠反映大腦特殊的病理生理學(xué)過(guò)程,檢測(cè)和量化其中的多種分子對(duì)疾病的診療起著重要作用,有報(bào)道表明,對(duì)腦脊液中淀粉樣β蛋白、微管相關(guān)總tau蛋白及磷酸化的tau蛋白的檢測(cè)能夠區(qū)分阿爾茲海默病和非阿爾茲海默病的老年癡呆。本文主要討論了腦脊液保存的特點(diǎn),包括完善患者電子病歷及與數(shù)據(jù)庫(kù)的連接、二維碼標(biāo)簽應(yīng)用的重要性、實(shí)施自動(dòng)化檢索以及前處理因素對(duì)腦脊液的影響。
本文總結(jié)了以下幾點(diǎn)可能對(duì)的腦脊液前處理產(chǎn)生影響的因素:
1.與患者相關(guān)因素。
包括患者在樣本采集當(dāng)日禁食、吸煙、飲酒、咖啡因攝入量和鍛煉等因素,這些因素可能影響腦脊液中生物標(biāo)志物的含量;
2.實(shí)驗(yàn)室處理因素。
腦脊液和配對(duì)血液收集指南
標(biāo)號(hào)
處理過(guò)程
腦脊液
血液
A收集步驟
1、收集和儲(chǔ)存時(shí)間;記錄收集的時(shí)間和日期;同左
2、建議采集量:至少12ml,第1-2ml用于常規(guī)CSF檢測(cè)。后10ml用于儲(chǔ)存,10ml EDTA處理的血漿;10ml血清
3、穿刺部位:L3-L5椎間隙,血管
4、血液污染:放棄被血細(xì)胞污染的CSF
血液細(xì)胞污染的標(biāo)準(zhǔn)為:500個(gè)/ul。記錄用于診斷樣本中的血細(xì)胞數(shù)量;無(wú)
5、穿刺針型號(hào):無(wú)創(chuàng)傷,標(biāo)準(zhǔn)型號(hào):21-23G
6、采集管型號(hào):型號(hào)為大于10ml的旋蓋聚乙烯胺采集管,血清:無(wú)凝血激活劑或凝膠,EDTA血漿:無(wú)蛋白酶抑制劑
7、其他應(yīng)同時(shí)收集的體液標(biāo)本:血清;無(wú)
8、其他應(yīng)同時(shí)收集的體液標(biāo)本:血漿:EDTA(優(yōu)于檸檬酸)處理;無(wú);B保存前處理
9、凍存前保藏溫度;離心及離心前、后均置于室溫中;同左
10、離心:2000g(1800-2000),10min,室溫離心;同左
11、修正案草案修改了人口與計(jì):30-60min,最長(zhǎng)不超過(guò)2h。離心后樣本應(yīng)該立即分裝凍存,間隔時(shí)間不超過(guò)2h;30-60min,最長(zhǎng)不超過(guò)2h;用于蛋白組學(xué)研究的樣品離心后1h內(nèi)處理。血清凝血最少需要30min。
12、分裝管型號(hào):修正案草案修改了與全靈2ml分裝用于常規(guī)檢測(cè),1ml分裝于樣本庫(kù))并記錄廠家;同左
13、分裝份數(shù):最少分裝2管。建議的研究用量為10ml,因此分裝份數(shù)大于10份
最少
14、每管分裝量:每份最少量為0.1ml,具體參照分裝管型號(hào)(0.2ml、0,5ml、1ml),管內(nèi)儲(chǔ)存量為總體積75%;同左
15、編碼:修正法草案規(guī)定,具備相應(yīng)專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員、設(shè)施設(shè)備、倫理審查機(jī)構(gòu)以及管理制度的醫(yī)療;同左
16、凍存溫度:-80℃;同左
目前,ISBER及生物樣本庫(kù)科學(xué)工作小組對(duì)當(dāng)前生物樣本庫(kù)質(zhì)控進(jìn)行總結(jié)。研究發(fā)現(xiàn)前處理差異可能影響血液中某些酶活性,但這些研究都需要反復(fù)論證和實(shí)驗(yàn)。由于腦脊液中蛋白豐度較低甚至低于常規(guī)檢測(cè)方法的檢測(cè)閾值,這使得很少的方法能夠用于腦脊液生物標(biāo)記物的檢測(cè)。