將菌種保存在-80℃冰箱中，以緩解細(xì)胞生理活動(dòng)的冷凍。液氮罐制造商分享如下操作步驟：

　　先做好安瓿管的準(zhǔn)備

　　安瓿管材料應(yīng)為中性玻璃。清洗安瓿管時(shí)，用2%硫酸浸泡一夜。自來(lái)水沖洗干凈后，用蒸餾水浸泡至pH中性。干燥后，貼上標(biāo)簽，標(biāo)明菌號(hào)和時(shí)間。加入脫脂棉塞后，在121℃下進(jìn)行高壓滅菌(15℃)～20)min，備用。

　　如何利用液氮將菌種冷凍在-80℃

　　其次，要做好保護(hù)劑的選擇準(zhǔn)備

　　保護(hù)劑的類型應(yīng)根據(jù)微生物的類型進(jìn)行選擇。制備保護(hù)劑時(shí)，應(yīng)注意其濃度和pH值，以及滅菌方法。如血清，可過濾滅菌;牛奶應(yīng)先脫油，用離心法去除上油，一般在100℃間歇煮2～3次，每次(10～30)min，備用。自增壓液氮罐

　　今后，要注意微生物保存物的準(zhǔn)備

　　在*適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件下，將細(xì)胞培養(yǎng)到靜止期或成熟期，經(jīng)過純度檢查，與保護(hù)劑攪拌均勻，分裝。微生物培養(yǎng)物濃度應(yīng)低于細(xì)胞或細(xì)胞(108-1010)個(gè)/ml(大腸桿菌)(Escherichiacoli)例如，為了獲得每毫升1010個(gè)活細(xì)胞菌液2ml～2.5mL，只有兩個(gè)10ml瓊脂斜坡)。

　　選擇較長(zhǎng)的毛細(xì)滴管，直接滴入安瓿管底部，切記不要濺到上管壁上，每管裝配量約(0.1～0.2)mL，如果是球形安瓿管，則裝載量為半個(gè)球。如果是液體培養(yǎng)的微生物，應(yīng)離心去除培養(yǎng)液，然后將培養(yǎng)物與保護(hù)劑混合，然后放入安瓿管中。安瓿管的分裝時(shí)間應(yīng)盡可能短，*幸運(yùn)的是(1)～2)ml內(nèi)分裝并預(yù)凍。分裝時(shí)應(yīng)注意在無(wú)菌環(huán)境中操作。自增壓液氮罐

　　然后進(jìn)行凍結(jié)保存

　　將安瓿管或塑料冷凍管儲(chǔ)存在-80℃的環(huán)境中。

　　我們還必須知道，如果我們想在冷藏后取出復(fù)蘇方法。從冰箱中取出安瓿管或塑料冷凍管，應(yīng)立即放置38℃～40℃水浴迅速恢復(fù)，適當(dāng)快速搖晃。直到內(nèi)部?jī)鼋Y(jié)完全溶解，約需50s～100s。打開安瓿管或塑料冷凍儲(chǔ)存管，將內(nèi)容物移至適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)。