第一,在細(xì)胞培養(yǎng)過程中使用?
細(xì)胞培養(yǎng)的一般過程主要包括四個(gè)步驟:準(zhǔn)備、材料提取、培養(yǎng)和冷凍復(fù)蘇。為了儲(chǔ)存細(xì)胞,尤其是不易獲得的突變細(xì)胞或細(xì)胞株,應(yīng)冷凍細(xì)胞。冷凍溫度一般采用196℃液氮溫度,將細(xì)胞收集到冷凍管中,加入含有保護(hù)劑(一般為二甲基亞或甘油)的培養(yǎng)液,冷卻速度一定,最后儲(chǔ)存在液氮中。在極低的溫度下,細(xì)胞的保存時(shí)間幾乎是無限的。定制液氮罐
二是胚胎冷凍儲(chǔ)存技術(shù)技術(shù)
胚胎冷凍儲(chǔ)存技術(shù)是指利用低溫保護(hù)劑在低溫環(huán)境下儲(chǔ)存胚胎的技術(shù)。這項(xiàng)技術(shù)是由于人工授精技術(shù)在20世紀(jì)下半葉的廣泛應(yīng)用造成的。動(dòng)物胚胎的冷凍保存原理是由于低溫降低了胚胎中的變質(zhì)反應(yīng)速度。溫度越低,胚胎保存時(shí)間越長。
目前研究了慢速冷凍、快速冷凍、一步冷凍、直接移植冷凍、玻璃化冷凍等多種胚胎冷凍保存方法。玻璃化冷凍法的步驟如下:
①在室溫下預(yù)處理胚胎25%玻璃化溶液(VS液)15分鐘。
?、谠诟邼舛?75%190%)的VS液中儲(chǔ)存預(yù)處理后的胚胎20-40分鐘。
?、蹖⒔?jīng)過兩步抗凍處理的胚胎直接放入液氮中儲(chǔ)存。
另外還可將菌種、疫苗、骨組織、精子等成分儲(chǔ)存在液氮罐中,均可達(dá)到良好的長期儲(chǔ)存效果。