菌種保存一般采用哪種方法?液氮罐廠家表示,液氮低溫保存方法存儲微生物*可靠,大多數(shù)*級菌種保存單位都采用這種方法。
1、液氮儲存安培管的準(zhǔn)備要求能夠承受溫度的突然變化而不開裂。因此,需要由硼硅酸鹽玻璃制成的安培管。安培管的尺寸通常為75×安培瓶10毫米。
2、添加保護劑和殺菌儲存細(xì)菌、酵母或霉菌孢子等容易松弛的細(xì)胞時,將空安培管塞上棉塞,在壓力0.11mpa、溫度121℃的環(huán)境下殺菌15min;如果儲存霉菌菌絲,應(yīng)提前在安培管中參與保護劑,如10%甘油蒸餾水溶液或10%二甲亞砜蒸餾水溶液。參與量僅限于未來參與的菌種塊,然后進(jìn)行高壓滅菌。
3、接入菌種,用10%甘油蒸餾水溶液將菌種制成菌懸液,放入滅菌安培管中;霉菌絲可以用殺菌打孔機從平板電腦上切下細(xì)菌塊,放入含有保護劑的安培管中,然后用火焰熔化。浸入水中,檢查是否有縫隙。
4、冷凍后,將密封的安培管慢慢冷凍至-30℃,每分鐘降低1℃。如果細(xì)胞迅速冷凍,它們會在細(xì)胞中形成冰晶,從而降低存活率。定制液氮罐
5、冷凍至-30℃的安培管立即放入液氮冷凍保存器的小圓筒中,然后將小圓筒放入液氮保存器中。液氮保存器內(nèi)氣相為-150℃,液氮為-196℃。
6、恢復(fù)培養(yǎng)和保存的菌種需要耗時,取出安培管,立即放入38~在40℃的水浴中迅速凍結(jié),直到全部融化。然后打開安培管,將內(nèi)容物移到合適的培養(yǎng)液上進(jìn)行培養(yǎng)。
綜上所述,該方法除了適用于一般微生物的保存外,還可以長期保存一些難以保存的微生物,如支原體、支原體、氫細(xì)菌、霉菌、噬菌體和動物細(xì)胞,難以形成細(xì)胞,不易發(fā)生變異。缺點是需要特殊設(shè)備。本文僅供理解。如果您有任何問題,請聯(lián)系我們以便及時調(diào)整。