細(xì)胞的液氮冷凍保存復(fù)蘇技術(shù)主要冷凍設(shè)備和材料,常用的細(xì)胞冷凍貯存器為
液氮罐,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):
1、一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充液氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。
2、液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。
3、在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并且要用厚紙卷筒或者特別定制的漏斗作為引導(dǎo),使液氮能夠直達(dá)瓶子的底部,如果有專用的液氮罐灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度聚降而使容器損壞。
液氮罐
細(xì)胞液氮凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或者無色新鮮甘油(121蒸氣高壓消毒),2ml安瓿(或者專用細(xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或者凍存管架)等。