怎么在
液氮罐里儲(chǔ)存細(xì)胞呢?一般來講,凍存細(xì)胞的步驟會(huì)影響到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力,所以在使用液氮罐儲(chǔ)存細(xì)胞時(shí)應(yīng)小心并按步驟操作,以下是由液氮罐整理的資料,僅供參考。
1、預(yù)先配制凍存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存預(yù)冷;
2、用胰酶對(duì)細(xì)胞進(jìn)行消化:倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,PBS沖洗兩次,用胰酶消化細(xì)胞(盡可能溫和);
3、再次用完全培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,將預(yù)冷的凍存液加入消化完全的細(xì)胞中,用滴管輕輕吹打混勻。
4、在每支凍存管中加入1ml細(xì)胞液,密封后標(biāo)記凍存細(xì)胞名稱和凍存日期。
5、凍存步驟的細(xì)致直接關(guān)系到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力,如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入
液氮罐)最好;或者可以在4℃,2h;
再總結(jié)一句,一般細(xì)胞在-80℃存放半年左右,在液氮里可以放置更長時(shí)間。