用液氮罐冷凍細(xì)胞的原理:液氮冷凍技術(shù)是近代治療學(xué)領(lǐng)域中的一門新技術(shù)。冷凍治療是一種冷凍生物學(xué)的綜合效應(yīng)。正常細(xì)胞在極度冷凍的狀態(tài)下,會發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的損害。
細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于零下196~C液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。
除此之外,還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細(xì)胞。 細(xì)胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑——終濃度5%~15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細(xì)胞損傷。標(biāo)準(zhǔn)冷凍速度開始為-1 到 -2℃/min,當(dāng)溫度低于-25℃時可加速,到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。
特別要注意的是:操作時應(yīng)小心,以免液氮凍傷。液氮定期檢查,隨時補充,絕對不能揮發(fā)干凈,班德液氮罐30升一般液氮能用280天左右